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简答题
7.从理论和应用上说明有机溶剂、盐类、SDS、有机酸等对蛋白质的影响。
答案解析
正确答案：答：在有机酸:如TCA、磺基水杨酸等存在下,绝大多数蛋白质带正电荷;可与酸根负离子形成不溶性复合物而沉淀析出,在临床上,预分析血液中的游离氨基酸的量,向血液中加入TCA,使蛋白质沉淀,离心取上清液即可用于氨基酸的分析。有机溶剂:如丙酮、乙醇等,可使蛋白质沉淀。因有机溶剂使蛋白质脱水,介电常数降低。应用:制备有活性的酶或蛋白质性质的激素等常用丙酮将材料制成于粉以便于保存:用乙醇抽提制备某些醇溶性蛋白。SDS:十二烷基硫酸钠,是一种阴离子去污剂,表面带大量的负电荷,可与蛋白质的疏水性基团结合使蛋白质变性。蛋白质分子越大,结合的SDS量越多;负电性越大,因而在电场中的迁移速度不同。SDS-PAGE电泳法测定蛋白质的相对分子质量即根据此原理。在核酸制备中用SDS破坏膜结构,去除蛋白质、核酸酶等。盐类:在低盐溶液中,大多数蛋白质的溶解度增加;在高盐溶液中,由于蛋白质分子表面的电荷被中和,破坏了双电层,蛋白质将沉淀析出。不同蛋白质氨基酸组成不同,在不同盐浓度的溶液中溶解行为不同,可用盐析法沉淀蛋白质。重金属盐类:在碱性条件下,蛋白质带负电,可与重金属离子如汞离子、铅离子结合,形成不溶性的重金属蛋白盐沉淀。因此,长期从事重金属作业的人,应吃高蛋白食物,以防止重金属离子被机体吸收。临床上,常用乙酸铅或硫酸钢沉淀体液中的蛋白质,以分析体液中的氨基酸或其他小分子化合物。生物碱是植物组织中具有显著生理作用的一类含氮的碱性物质,能够沉淀生物碱的试剂称为生物碱试剂。如单宁酸、苦味酸、三氯乙酸等都能沉淀生物碱,故称它们为生物碱试剂。在酸性条件下,蛋白质带正电荷,可与生物碱试制,如三氧乙酸的酸根离子结合成为溶解度较小的盐类而沉淀。“柿石症”的产生就是由于空腹吃了大量的柿子,柿子中含有单宁酸,使肠胃中的蛋白质凝固变性而成为不能被消化的“柿石”
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