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简答题

35.在复制时DNA解螺旋影响DNA的超螺旋密度。在DNA拓扑异构酶不在的时候,复制又前面的DNA过分超螺旋,而复制叉后面的DNA螺旋不足。复制叉前面的DNA超螺旋密度如果超过+0.14复制叉将停止前进。假定一个6000bp的质粒在体外以双向复制而反应体系中没有拓扑异构酶。质粒原先的d=-0.06,问在复制叉停止前进以前每个复制叉多少碱基对被解螺旋并复制?假定每个复制叉运动速度相同,且体系中存在着除了拓扑异构酶以外的所有DNA延长所需的成分。

答案解析

正确答案:答:此质粒松弛状态的连系数Lk。=6000(bp)/10.5(bp)=571(保留整数)质粒的超螺旋密度是-0.06故它的拓扑连系数应是O(超螺旋密度)=Lk-Lk0/Lk0则Lk=571+(-0.06×571)=537在没有DNA拓扑酶活性的情况下,DNA复制解螺旋并没有改变质粒的Lk值,而是靠复制叉前面增加超螺旋密度来补偿。因此,设复制停止前被解开的螺旋数为a,则复制叉前面部分的Lk应为537,故:(571-a)×(1+0.14)=537,a=100(螺旋)复制停止前被解开的DNA碱基对数=100×10.5=1050(bp)(即约有1050个碱基对被螺旋)。每个复制又解螺旋并复制DNA525bp
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