多选题
461.有关尿蛋白定性试验,正确的说法是
A
加热醋酸法中若加入的醋酸过多,可使阳性减弱
B
加热醋酸法加入醋酸是使尿pH接近蛋白质等电点
C
磺基水杨酸法可使本周蛋白沉淀
D
大剂量青霉素可使磺基水杨酸法测定尿蛋白出现假阳性反应
E
干化学试带法是利用指示剂的蛋白质误差原理
答案解析
正确答案:ABDE
解析:
本题考查尿蛋白定性试验的原理、影响因素及不同检测方法的特点。以下是对各选项的解析及核心知识点讲解。
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**A: 加热醋酸法中若加入的醋酸过多,可使阳性减弱**
**正确。**
加热醋酸法是传统的尿蛋白定性方法。其原理是:加热使蛋白质变性凝固,加醋酸调节尿液pH至接近蛋白质的等电点(约pH 4.5~5.5),促进蛋白质沉淀。但若加入醋酸过多,会使尿液pH过低,导致蛋白质分子重新带正电荷,增加溶解度,反而抑制沉淀形成,从而减弱阳性反应,甚至出现假阴性。
**知识点:** 酸碱环境影响蛋白质的电荷状态和溶解度。在等电点时蛋白质净电荷为零,最易沉淀;偏离等电点时溶解度增加。
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**B: 加热醋酸法加入醋酸是使尿pH接近蛋白质等电点**
**正确。**
此说法准确描述了加热醋酸法的关键机制。血浆白蛋白的等电点约为pH 4.7~5.0,正常尿液pH偏高或偏低均不利于蛋白沉淀。加入醋酸可将尿液pH调整至此范围,有利于蛋白质析出,提高检测灵敏度。
**知识点:** 蛋白质等电点是指蛋白质分子所带净电荷为零时的pH值。在此pH下,蛋白质溶解度最低,易发生沉淀。
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**C: 磺基水杨酸法可使本周蛋白沉淀**
**错误。**
磺基水杨酸法(Sulfosalicylic Acid Test, SSA)是一种常用的尿蛋白定性方法,通过与蛋白质结合形成不溶性复合物产生浑浊或沉淀。该法对清蛋白、球蛋白、轻链蛋白(如本周蛋白)均有较强沉淀作用,因此**实际上可以沉淀本周蛋白**。
但需注意:虽然SSA法能检出本周蛋白,但并非特异性方法。确诊本周蛋白需依赖加热沉淀法(如90℃加热后沉淀,加酸不完全溶解)或免疫固定电泳等进一步检查。
然而,在临床实践中,SSA法对本周蛋白确实具有较高的敏感性,通常认为其可检出本周蛋白。因此部分资料可能支持此项为正确。
但根据标准答案为ABDE,说明此处命题人认为C项“不正确”,可能是基于以下理解:
- 严格意义上,本周蛋白为单克隆免疫球蛋白轻链,其在SSA法中虽可沉淀,但在某些浓度或条件下可能出现非典型反应;
- 或命题意图强调“磺基水杨酸法主要用于总蛋白检测,并非常规用于本周蛋白的确诊”。
尽管存在争议,依据给定答案,**C未被选入正确选项**,故应视为命题设定下的“错误”表述。
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**D: 大剂量青霉素可使磺基水杨酸法测定尿蛋白出现假阳性反应**
**正确。**
大剂量青霉素类抗生素(尤其是青霉素G)及其代谢产物在尿中浓度较高时,可与磺基水杨酸发生非特异性结合,形成沉淀,导致尿蛋白定性试验呈假阳性。这是磺基水杨酸法的一个重要干扰因素。
**知识点:** 某些药物(如青霉素、头孢菌素、喹宁、放射造影剂等)可干扰化学法尿蛋白检测,造成假阳性结果。
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**E: 干化学试带法是利用指示剂的蛋白质误差原理**
**正确。**
干化学试带法检测尿蛋白基于“蛋白质误差”原理。试带上含有溴酚蓝等pH指示剂,其变色范围通常在pH 3.0~4.6之间。在无蛋白时,试剂块维持弱酸环境显黄色;当尿中有蛋白质(主要是清蛋白)时,蛋白质与指示剂结合,使其释放H⁺的能力下降,导致颜色向蓝色转变,颜色深浅与蛋白含量成正比。
需要注意的是,该法主要对清蛋白敏感,对球蛋白、本周蛋白等敏感度较低。
**知识点:** “蛋白质误差”是指某些蛋白质能抑制酸性染料解离,引起指示剂颜色变化的现象,常用于快速筛查尿蛋白。
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**综上分析:**
- A 正确:醋酸过多降低沉淀效率。
- B 正确:调节pH至等电点利于蛋白沉淀。
- C 错误(依命题设定):尽管SSA法可检出本周蛋白,但可能因特异性问题未被认可。
- D 正确:青霉素可致假阳性。
- E 正确:干化学法基于蛋白质误差原理。
**正确答案:ABDE**
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**教学提示:**
学生在学习尿蛋白检测方法时,应掌握三种主要方法——加热醋酸法、磺基水杨酸法、干化学试带法的原理、优缺点及干扰因素。特别注意不同方法对各类蛋白(清蛋白、球蛋白、轻链蛋白)的敏感性差异,以及药物、pH等因素的影响。
