多选题
205.实验中,促进凝集现象的措施有( )
A
低温离心
B
加入抗原
C
增加电解质或蛋白质
D
加入右旋糖酐或葡聚糖
E
用胰酶处理
答案解析
正确答案:CDE
解析:
本题考查的是免疫学实验中促进凝集反应的相关措施。凝集反应是指颗粒性抗原(如细菌、红细胞等)与其相应抗体在适当条件下发生特异性结合,形成肉眼可见的凝集团块的现象。该反应的发生受多种因素影响,以下是对各选项的解析及核心知识点讲解。
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**A: 低温离心**
此选项错误。低温可能减缓分子运动,抑制抗原抗体反应速率,不利于凝集现象的形成。相反,多数凝集反应在37℃等适宜温度下进行更为迅速和明显。离心虽可加速沉淀,但低温条件不利于免疫复合物的形成,因此“低温离心”不是促进凝集的有效措施。
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**B: 加入抗原**
此选项错误。凝集反应需要适量的抗原与抗体结合,但单纯“加入抗原”并不一定促进凝集。若抗原过多,会导致前带现象(prozone effect),即抗体相对不足,无法形成大的交联网络,反而抑制凝集。因此,抗原浓度需适中,过量反而抑制凝集。故此项不能作为普遍促进凝集的措施。
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**C: 增加电解质或蛋白质**
此选项正确。电解质(如生理盐水或缓冲液中的离子)可中和抗原与抗体表面的电荷,降低其间的排斥力,促进二者结合并形成交联结构,从而有利于凝集。此外,某些蛋白质(如白蛋白)可增强反应的敏感性,提高凝集效率。这是经典凝集反应(如玻片凝集、试管凝集)中常用的方法。
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**D: 加入右旋糖酐或葡聚糖**
此选项正确。右旋糖酐、葡聚糖等大分子多糖具有“空间填充效应”,可增加介质的黏度,促进抗原抗体分子的碰撞频率,并通过排除体积效应(excluded volume effect)促使免疫复合物聚集,从而显著增强凝集反应的强度和速度。这类物质常用于增强弱凝集反应的检测灵敏度。
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**E: 用胰酶处理**
此选项正确。胰酶(如胰蛋白酶)可作用于某些细胞表面结构,去除表面的唾液酸等带负电荷的成分,从而减少细胞表面的静电排斥;同时可能暴露或改变抗原位点,使其更易与抗体结合,促进交联凝集。例如,在血型鉴定中,对红细胞进行胰酶处理可增强某些抗体引起的凝集反应。
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**核心知识点总结:**
1. **凝集反应的本质**:颗粒性抗原与相应抗体结合,在电解质存在下形成肉眼可见的凝集体。
2. **影响凝集的因素**:
- 温度:通常在37℃或室温较适宜,低温不利。
- pH值:接近中性为宜。
- 抗原抗体比例:需保持适当比例,避免前带或后带现象。
- 电解质:提供离子环境,中和电荷,促进结合。
- 助凝剂:如右旋糖酐、葡聚糖等大分子物质可增强凝集。
- 酶处理:如胰酶、木瓜酶等可改变细胞表面性质,增强反应性。
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**正确答案:C、D、E**
理由:增加电解质或蛋白质可中和电荷促进结合;右旋糖酐或葡聚糖通过空间效应增强聚集;胰酶处理可改变抗原表面结构,利于抗体结合与交联。这三项均为实验中常用的促进凝集的有效手段。
