简答题
12.试述制备膜外周蛋白和膜内在蛋白的主要差别。
答案解析
正确答案:答:①对膜表面结合的外周蛋白一般采用提高离子强度(高盐浓度)和低浓度去垢剂,破坏蛋白与膜脂的静电结合作用或与其他膜蛋白的相互作用,使外周蛋白与膜解离,然后再采用常规方法进行纯化。②对膜内在蛋白的制备:这类蛋白质不易分离,需采用剧列的方法如用去垢剂(Triton-100、SDS、脱氧胆酸钠)或有机溶剂等破坏膜的结构,并将蛋白质从膜上溶解下来,然后透析除去去垢剂。由于这类蛋白质不溶于水,经透析后易于再次形成不溶物,需视情况采取特殊措施进行纯化。
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