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简答题
49.简述二维电泳的基本原理及应用
答案解析
正确答案：答：二维电泳是等电聚焦电泳和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的组合。第一向为等电聚焦电泳,蛋白质依pI沿pH梯度分离。在电场作用下,由多羧基、多氨基脂肪族化合物异构物/同系物之混合物构成的载体两性电解质,按各自pl在凝胶中形成从阳极到阴极逐渐增加的线性pH梯度。蛋白质在pH梯度凝胶中泳动,当迁移至pH等于pl处时,不再泳动,而被浓缩成狭窄的区带。第一向电泳结束后,将胶条旋转90°替代浓缩胶置于已凝集的分离胶顶部进行第二向,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳电泳,蛋白质即按照分子大小再次分离。这一技术已广泛应用于生命科学学研究的各个领域,在全蛋白组分析、细胞分化及凋亡检测、病原体致病机制及耐药机制探究、肿瘤标志物及治疗靶点筛查、新药开发、蛋白纯度检查、微量蛋白纯化、疫苗开发等许多研究过程中发挥重要作用。
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