27.蛋白质分离纯化技术中哪些与它的等电点有关?试述这些技术分离提纯蛋白质的原理。

37.在体外进行的蛋白质合成实验中,可用还原法把Cys-RNACYS可转变为Ala-tRNACys,问:1)用14C标记Ala-tRNACys中的丙氨酸进行蛋白质合成实验,标记的丙氨酸能掺入多肽链中丙氨酸的位置吗?2)氨酰tRNA合成酶在蛋白质合成中的重要性是什么?

36.为什么遗传密码是三联体的(三个碱基一组)而不是二联体或四联体的?

35.细菌分泌蛋白OmpA的前体Proompa有分泌过程所需的氨基末端信号顺序。如果纯化的Proompa前体用8mol/L尿素变性后除去尿素(可把蛋白溶液迅速通过凝胶过滤色谱柱)。这种蛋白前体在体外实验中能在分离的细菌内膜中穿膜转位,但是如果这个蛋白在无尿素的情况下保温几个小时,转位就不可能的了。如果在另一种被称为“触发因子”的细菌蛋白存在下这个蛋白的转位能力可以得到维持。叙述这种因子可能的功能

34.DNA聚合酶合成DNA时依靠3→5外切酶切去错配核苷酸残基进行校对,但肽链合成时核糖体实际上无法识别附着于tRNA的氨基酸的身份。不正确氨基酸插入后再水解切除在实践上是不可能的,为什么?(提示,考虑生长中的肽链是如何与mRNA保持联系的。)

33.一些氨酰-tRNA合成酶不识别它的对应tRNA的反密码子而识别tRNA的其他结构以表达特异性,丙氨酸tRNA明显属于这种类型(a)丙氨酸-tRNA合成酶是靠什么机制识别tRNA?(b)描述TRNA反密码子第三位由C→G突变的影响(c)什么类型的其他突变会造成同样后果?(d)从未发现这种类型的突变在生物界天然发生,为什么?

32.镰刀型细胞贫血症是由正常血红蛋白A的β珠蛋白的链6位发生Val取代Glu残基造成的,你能估计DNA密码发生什么改变才造成缬氨酸残基取代谷氨酸残基?

31.甘氨酸的4个密码子是GGU、GGC、GGA和GGG,请写出它们所有可能的反密码子(a)根据你的答案决定甘氨酸密码子特异性是密码子的哪几个位置?(b)这些密码子反密码子配对中哪个配对中有摆动碱基?(c)哪些密码子一反密码子配对所有三个位置都是watson-crick配对?

30.据高能磷酸键的消耗计算生物合成血红蛋白B链(146个残基)的最低能量消耗,把计算结果与生物合成一个146葡萄糖残基(a1→4)的线形糖原的直接能量消耗作比较。根据你的计算,合成蛋白质比起糖原多消耗多少能量?除了合成蛋白时直接的能量消耗,还有非直接的能量消耗,细胞必须合成蛋白质合成所需的各种酶。根据酶法机制比较真核细胞生物合成a1→4直链糖原和生物合成多肽链的非直接能量消耗的数量差别

29.遗传密码是用酶法或化学法合成的人工寡核苷酸破译的,假定我们预先知道遗传密码,你怎样能合成一条多核苷酸链作为mRNA使它大部分编码Phe残基,一小部分编码Leu和Ser残基?这条多核苷酸链还能编码着极小量的什么氨基酸?

28.一个双螺旋DNA片断的模板链含有顺序(5’)GTTAACACCCCTGACTTCGCGCCGTCG(a)写出从这条链转录产生的mRNA的碱基顺序;(b)从(a)中的mRNA的5’末端开始翻译产生的肽链的氨基酸顺序是什么;(c)如果这条DNA的互补链被转录和翻译,产生的氨基酸顺序和(b)中的一样吗?解释你的答案的生物学重要性