单选题
1023、可溶性抗原定量测定常用的方法是
A
免疫印迹法
B
ELISA(夹心法)
C
直接凝集试验
D
ELISA(间接法)
E
免疫荧光技术
答案解析
正确答案:B
解析:
好的,我们来详细解析一下这道题。
### 题目背景
这道题考察的是可溶性抗原定量测定的方法。可溶性抗原是指能够在溶液中溶解的抗原,如蛋白质、多糖等。定量测定这些抗原的浓度在临床诊断和科学研究中非常重要。
### 选项解析
**A. 免疫印迹法**
- **原理**:免疫印迹法(Western Blot)是一种用于检测特定蛋白质的技术。它通过电泳分离蛋白质,然后将蛋白质转移到膜上,再用特异性抗体进行检测。
- **适用范围**:主要用于定性检测,而不是定量测定。
- **缺点**:操作复杂,耗时较长,不适合快速定量。
**B. ELISA(夹心法)**
- **原理**:酶联免疫吸附测定(ELISA)是一种常用的免疫学方法,其中夹心法是最适合定量测定可溶性抗原的方法。夹心法的基本步骤包括:
1. 将捕获抗体固定在固相载体上。
2. 加入待测样本,样本中的抗原与捕获抗体结合。
3. 加入标记有酶的检测抗体,形成“夹心”结构。
4. 加入底物,产生颜色反应,通过比色法测定吸光度,从而计算出抗原的浓度。
- **优点**:灵敏度高,特异性强,操作简便,适合批量检测。
- **适用范围**:广泛用于临床和科研中的可溶性抗原定量测定。
**C. 直接凝集试验**
- **原理**:直接凝集试验是通过观察颗粒表面抗原与相应抗体结合后形成的肉眼可见的凝集现象来判断结果。
- **适用范围**:主要用于定性检测,如血型鉴定、细菌鉴定等。
- **缺点**:不适用于定量测定,且灵敏度较低。
**D. ELISA(间接法)**
- **原理**:ELISA间接法主要用于检测抗体,而不是抗原。其基本步骤包括:
1. 将抗原固定在固相载体上。
2. 加入待测样本,样本中的抗体与抗原结合。
3. 加入标记有酶的二抗,形成复合物。
4. 加入底物,产生颜色反应,通过比色法测定吸光度。
- **适用范围**:主要用于抗体的检测,而不是抗原的定量测定。
**E. 免疫荧光技术**
- **原理**:免疫荧光技术是利用荧光标记的抗体与目标抗原结合,通过荧光显微镜观察荧光信号来检测抗原或抗体。
- **适用范围**:主要用于细胞或组织中的抗原定位,也可以用于定性检测。
- **缺点**:不适用于定量测定,且需要荧光显微镜等设备。
### 为什么选B
**答案:B. ELISA(夹心法)**
- **理由**:ELISA夹心法是目前最常用且最适合可溶性抗原定量测定的方法。它具有高灵敏度、高特异性、操作简便等优点,能够准确地测定样本中抗原的浓度。
相关知识点:
可溶性抗原定量用ELISA夹心法
