单选题
942、间接免疫荧光技术检测抗核抗体的基本原理是
A
将特异性第一抗体标记上荧光素检测抗原
B
将特异性抗原标记上荧光素检测抗体
C
将第二抗体标记上荧光素检测抗体
D
将特异性抗原标记上荧光素检测抗原或抗体
E
以上选项均不对
答案解析
正确答案:C
解析:
好的,我们来详细解析这道题。
### 题目背景
间接免疫荧光技术(Indirect Immunofluorescence, IIF)是一种常用的实验室方法,用于检测血清中的自身抗体,特别是抗核抗体(Antinuclear Antibodies, ANA)。ANA 是针对细胞核成分的自身抗体,常用于诊断自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮(SLE)等。
### 选项解析
**A. 将特异性第一抗体标记上荧光素检测抗原**
- **解释**:在直接免疫荧光技术中,特异性第一抗体被标记上荧光素,直接与抗原结合,然后通过荧光显微镜观察荧光信号。但这是直接免疫荧光技术,而不是间接免疫荧光技术。
- **错误原因**:间接免疫荧光技术不使用标记的第一抗体。
**B. 将特异性抗原标记上荧光素检测抗体**
- **解释**:这种方法并不存在。通常情况下,抗原不会被标记上荧光素来检测抗体。
- **错误原因**:不符合间接免疫荧光技术的原理。
**C. 将第二抗体标记上荧光素检测抗体**
- **解释**:这是间接免疫荧光技术的核心原理。首先,用未标记的特异性第一抗体(通常是患者血清中的抗体)与抗原结合,形成抗原-抗体复合物。然后,加入标记有荧光素的第二抗体(通常是抗人IgG抗体),第二抗体与第一抗体结合,形成抗原-第一抗体-第二抗体复合物。最后,通过荧光显微镜观察荧光信号,从而检测到抗原的存在。
- **正确原因**:符合间接免疫荧光技术的原理。
**D. 将特异性抗原标记上荧光素检测抗原或抗体**
- **解释**:如前所述,抗原通常不会被标记上荧光素来检测抗体或抗原。
- **错误原因**:不符合间接免疫荧光技术的原理。
**E. 以上选项均不对**
- **解释**:显然,选项 C 是正确的,因此这个选项是错误的。
### 答案解析
正确答案是 **C**。间接免疫荧光技术通过使用标记有荧光素的第二抗体来检测第一抗体(即患者血清中的抗体),从而确定抗核抗体的存在。
### 示例
假设我们要检测某患者的血清中是否存在抗核抗体:
1. **第一步**:将患者的血清(含有待测抗体)与已知的抗原(如HEp-2细胞核)孵育,使抗原与抗体结合。
2. **第二步**:加入标记有荧光素的第二抗体(如抗人IgG抗体),使其与第一抗体结合。
3. **第三步**:通过荧光显微镜观察,如果存在荧光信号,说明患者血清中有抗核抗体。
相关知识点:
间接免疫荧光测抗核抗体原理
