228.高浓度胆红素对酶法测定血清总胆固醇结果的影响不包括( )

本题考查高浓度胆红素对酶法测定血清总胆固醇结果的影响，属于临床生化检验中干扰因素分析的范畴。 【题干解析】 血清总胆固醇的测定常用酶法（如胆固醇氧化酶-过氧化物酶法，CHOD-PAP法）。该方法具有特异性高、灵敏度好、操作简便等优点。但在实际检测过程中，某些内源性或外源性物质可能对反应体系产生干扰，影响测定结果的准确性。胆红素是常见的内源性干扰物之一，尤其在黄疸患者中，血清胆红素浓度显著升高，可能对比色过程产生影响。 【选项解析】 A: 对结果无影响 错误。高浓度胆红素会对酶法测定总胆固醇产生干扰。胆红素本身具有还原性，在过氧化物酶参与的显色反应中，可竞争性地消耗反应中产生的过氧化氢（H₂O₂），从而抑制显色反应，导致吸光度降低，使测定结果偏低。因此，胆红素并非无影响，此选项错误，应选。 B: 干扰比色使结果偏低 正确。胆红素的还原性会干扰Trinder反应（即酚+4-氨基安替比林+H₂O₂ → 红色醌亚胺染料），通过清除H₂O₂减少色素生成，导致比色信号减弱，最终使测定值低于真实值。此选项描述正确，不应选择。 C: 降低反应色泽 正确。由于胆红素消耗H₂O₂，导致显色反应不充分，反应体系的颜色变浅，即“降低反应色泽”。此选项正确，不应选择。 D: 胆红素的干扰小于化学法 正确。传统的化学法（如Liebermann-Burchard法）对脂类物质的特异性较低，且易受多种色素和还原性物质干扰，而酶法虽然也受胆红素影响，但整体干扰程度相对较小，且可通过样本空白校正、使用抗干扰试剂等手段减轻。因此，胆红素在酶法中的干扰通常小于化学法。此选项正确，不应选择。 E: 干扰比色使结果偏高 错误。胆红素作为还原剂清除H₂O₂，抑制显色反应，导致吸光度下降，结果表现为偏低而非偏高。因此该选项说法错误，应选。 【正确答案】AE 【核心知识点总结】 1. 酶法测定总胆固醇原理： - 胆固醇酯酶水解胆固醇酯为游离胆固醇； - 胆固醇氧化酶催化游离胆固醇生成胆酸和H₂O₂； - 过氧化物酶利用H₂O₂氧化酚和4-氨基安替比林生成红色醌亚胺化合物； - 比色测定其吸光度，与胆固醇浓度成正比。 2. 干扰机制： - 内源性还原性物质（如胆红素、抗坏血酸、尿酸等）可清除反应体系中的H₂O₂，抑制显色反应，造成假性低值。 3. 干扰的控制： - 使用双试剂、延长孵育时间让内源性H₂O₂被自然分解； - 添加抗干扰酶（如胆红素氧化酶）预先降解胆红素； - 设置样本空白校正。 综上，高浓度胆红素主要通过其还原性干扰酶法测定总胆固醇的显色反应，导致结果偏低，故“无影响”和“使结果偏高”的说法均不成立。