多选题
188.淋巴瘤细胞系的选择,融合用的瘤细胞特性包括( )
A
是HGPRT缺陷株
B
在体外能无限快速生长
C
融合率高
D
不分泌淋巴因子和杀伤功能
E
缺乏某—特性的T细胞表面抗原或受体
答案解析
正确答案:ABCDE
解析:
本题考查的是淋巴瘤细胞系在细胞融合实验中的选择标准,尤其是在制备杂交瘤细胞或研究T细胞功能时所使用的瘤细胞特性。以下是对各选项的解析及核心知识点的讲解。
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**A: 是HGPRT缺陷株**
解析:HGPRT(次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)是参与核苷酸补救合成途径的关键酶。在细胞融合实验中,常采用HAT选择培养基来筛选成功融合的杂交细胞。HAT培养基中含有次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶(T)。氨基蝶呤可阻断核苷酸的从头合成途径,细胞必须依赖补救合成途径进行DNA合成。未融合的瘤细胞若为HGPRT缺陷株,则无法利用补救途径合成DNA,最终死亡;而融合后的杂交细胞可从正常B细胞或T细胞获得HGPRT基因产物,从而在HAT培养基中存活。因此,选择HGPRT缺陷株是确保筛选有效的重要条件。
结论:正确。
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**B: 在体外能无限快速生长**
解析:用于融合的瘤细胞必须具有永生化特性,即能够在体外长期传代并快速增殖。这是保证融合后杂交瘤细胞也能持续生长的基础。通常选用的是经过诱变或自然转化形成的肿瘤细胞系,如SP2/0、NS-1等小鼠骨髓瘤细胞系,它们都具备无限增殖能力。
结论:正确。
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**C: 融合率高**
解析:理想的融合用瘤细胞应具有较高的融合效率,以提高获得目标杂交细胞的概率。融合率受细胞膜特性、表面蛋白表达等因素影响。高融合率意味着在聚乙二醇(PEG)或电融合等条件下,更多细胞能够成功融合,从而提升实验成功率。
结论:正确。
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**D: 不分泌淋巴因子和杀伤功能**
解析:若瘤细胞本身具有分泌淋巴因子(如IL-2、IFN-γ)或具有细胞毒性功能,则可能干扰后续对杂交细胞功能的检测与分析。例如,在研究T细胞受体功能时,需排除瘤细胞自身活性带来的背景干扰。因此,选择无分泌能力和无杀伤活性的瘤细胞有助于获得纯净的功能性杂交细胞。
结论:正确。
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**E: 缺乏某一特性的T细胞表面抗原或受体**
解析:在构建T细胞杂交瘤或研究特定T细胞受体(TCR)功能时,常选用缺乏功能性TCR或CD3复合物等关键表面分子的瘤细胞作为融合伴侣。这样可以确保融合后所观察到的表型是由导入的T细胞基因或受体决定的,而非原有瘤细胞表达所致,有利于功能研究的准确性。
结论:正确。
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**核心知识点总结:**
1. **HAT筛选系统原理**:依赖于HGPRT酶的存在与否,实现对融合细胞的选择。
2. **永生化细胞系的应用**:保证杂交细胞可在体外长期稳定生长。
3. **融合效率的影响因素**:包括细胞状态、融合剂种类及瘤细胞本身的融合特性。
4. **功能静默性要求**:避免瘤细胞自身分泌或杀伤活性干扰实验结果。
5. **表面标志缺失的设计目的**:便于研究特定分子功能,减少背景干扰。
综上所述,ABCDE五个选项均符合用于融合的淋巴瘤细胞的理想特性,故全选正确。
