187.下列有关杂交瘤技术的叙述中,正确的是( )

本题考查杂交瘤技术的相关知识，该技术是制备单克隆抗体的核心方法。以下是对各选项的解析及涉及的核心知识点讲解。 --- **A:采用的细胞是小鼠脾细胞和小鼠骨髓细胞** 错误。 杂交瘤技术中使用的两种细胞是： - **小鼠脾细胞**（具体为B淋巴细胞，来源于经抗原免疫的小鼠脾脏） - **小鼠骨髓瘤细胞**（一种恶性浆细胞系，具有无限增殖能力） “骨髓细胞”是一个广义概念，包括造血干细胞等多种细胞，并非特指骨髓瘤细胞。此处混淆了“骨髓瘤细胞”与“骨髓细胞”的概念。正确说法应为“小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞”。 --- **B:选择性培养基为HAT培养基** 正确。 HAT培养基是杂交瘤技术中用于筛选杂交瘤细胞的关键选择性培养基。其名称来源于三种成分：次黄嘌呤（H）、氨基蝶呤（A）和胸腺嘧啶核苷（T）。 其筛选原理基于细胞的核苷酸合成途径： - 氨基蝶呤可阻断核苷酸的从头合成途径。 - 细胞需依赖补救合成途径，该途径需要HGPRT酶（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）和TK酶（胸苷激酶）。 - 骨髓瘤细胞通常被选为HGPRT缺陷型，不能在HAT培养基中存活。 - 脾细胞虽有HGPRT酶，但不能长期体外增殖。 - 杂交瘤细胞继承了脾细胞的HGPRT酶和骨髓瘤细胞的无限增殖能力，因此可在HAT培养基中存活并增殖。 因此，HAT培养基可有效筛选出成功融合的杂交瘤细胞。 --- **C:小鼠脾细胞需预先经抗原免疫** 正确。 为了获得能产生特异性抗体的B淋巴细胞，必须事先用特定抗原免疫小鼠。免疫后，小鼠脾脏中的B细胞会活化并产生针对该抗原的抗体。这些B细胞随后与骨髓瘤细胞融合，形成的杂交瘤细胞才能分泌特异性单克隆抗体。 这是确保单克隆抗体具有目标识别能力的前提。 --- **D:最常用的细胞融合剂为乙二醇** 错误。 最常用的细胞融合剂是**聚乙二醇**（PEG, Polyethylene Glycol），而非乙二醇（Ethylene Glycol）。 聚乙二醇是一种高分子化合物，能促进细胞膜融合，广泛应用于细胞融合实验中。乙二醇则主要用于防冻剂或化学合成，不具备有效的促融作用。两者化学结构和用途不同，不可混淆。 --- **E:其基本原理是通过融合两种细胞保持两种细胞的主要特性** 正确。 杂交瘤技术的基本原理正是细胞融合后的特性整合： - B淋巴细胞提供分泌特异性抗体的能力。 - 骨髓瘤细胞提供无限增殖的能力。 融合后的杂交瘤细胞兼具这两种特性，从而能够在体外长期培养并持续分泌单一类型的抗体，即单克隆抗体。 这种“优势互补”的融合策略是杂交瘤技术成功的关键。 --- **综上分析：** 正确答案为 **B、C、E**。 核心知识点总结： 1. 杂交瘤技术用于制备单克隆抗体。 2. 融合细胞为抗原免疫小鼠的脾B细胞与HGPRT缺陷型小鼠骨髓瘤细胞。 3. 使用HAT培养基筛选杂交瘤细胞。 4. 聚乙二醇（PEG）是最常用的细胞融合剂。 5. 技术原理是融合细胞继承双亲细胞的优良特性：抗体分泌能力和无限增殖能力。