多选题
57.双向琼脂扩散试验可用于( )
A
鉴定抗原或抗体的纯度
B
分析抗原的性质
C
分析抗在或抗体的相对分子量
D
抗原或抗体的定量
E
抗体效价的滴定
答案解析
正确答案:ABCE
解析:
本题考查双向琼脂扩散试验的应用范围。
双向琼脂扩散试验是一种经典的免疫学技术,其基本原理是可溶性抗原与相应抗体在琼脂凝胶中自由扩散,当两者比例适当时形成可见的沉淀线。该方法主要用于定性或半定量分析抗原与抗体之间的反应特性。
逐项解析选项:
A:鉴定抗原或抗体的纯度
正确。若待检样品中含有多种抗原成分,与特异性抗体反应时会出现多条沉淀线;若只出现一条沉淀线,提示抗原成分较为纯净。因此可用于判断抗原或抗体的纯度。
B:分析抗原的性质
正确。通过观察沉淀线的位置、形状、数量以及与其他已知抗原或抗体的交叉反应情况,可以推断未知抗原的性质。例如,若两条沉淀线部分融合,提示两种抗原有部分相同表位;若完全融合,说明抗原相同;若相交,则表明抗原不同。因此可用于抗原性质的分析。
C:分析抗原或抗体的相对分子量
正确。相对分子量较小的分子在琼脂中扩散速度较快,形成的沉淀线距离加样孔较远;而分子量较大的扩散较慢,沉淀线较近。通过比较扩散距离,可大致估计抗原或抗体的相对分子量大小,属于半定量分析。
D:抗原或抗体的定量
错误。双向琼脂扩散试验不能精确测定抗原或抗体的含量。虽然沉淀线的强度和位置与浓度有一定关系,但受多种因素影响,无法实现准确量化。如需定量,应采用单向琼脂扩散试验(如免疫扩散法)或更精确的方法如ELISA、火箭电泳等。
E:抗体效价的滴定
正确。将抗体按一定梯度稀释后,与固定浓度的抗原进行双向扩散,根据出现沉淀线的最高稀释倍数来判断抗体效价。因此可用于抗体效价的粗略测定。
综上所述,正确答案为 ABCE。
核心知识点总结:
1. 双向琼脂扩散试验基于抗原与抗体在凝胶中的自由扩散及特异性结合形成沉淀线。
2. 适用于抗原或抗体的定性分析,包括纯度鉴定、性质分析、相对分子量估计和抗体效价测定。
3. 不适用于精确定量,因其沉淀线的形成受扩散速率、浓度、时间等多种因素影响,重复性和准确性有限。
