单选题
163.血清蛋白电泳时通常用pH8.6缓冲液,此时各种蛋白质带有的电荷为:
A
白蛋白带正电荷,其他蛋白带负电荷
B
白蛋白带负电荷,其他蛋白带正电荷
C
白蛋白和其他蛋白均带负电荷
D
白蛋白和其他蛋白均带正电荷
答案解析
正确答案:C
解析:
题目:血清蛋白电泳时通常用pH8.6缓冲液,此时各种蛋白质带有的电荷为:
正确答案:C:白蛋白和其他蛋白均带负电荷
解析:
血清蛋白电泳是一种常用的分离血清中不同蛋白质成分的技术,其原理基于不同蛋白质在电场中因所带净电荷、分子大小和形状的差异而具有不同的迁移速率。
本题的关键在于理解蛋白质的电荷状态与其所处环境pH值及各自等电点(pI)之间的关系。
知识点讲解:
1. 蛋白质的电荷性质:
- 蛋白质是两性电解质,其表面可带有正电荷或负电荷,取决于其所处溶液的pH值。
- 当溶液pH > 蛋白质的等电点(pI)时,蛋白质倾向于失去质子(H⁺),整体带负电荷。
- 当溶液pH < 蛋白质的等电点时,蛋白质倾向于结合质子,整体带正电荷。
- 在等电点(pI)时,蛋白质净电荷为零。
2. 血清主要蛋白质的等电点:
- 白蛋白的等电点约为pH 4.7~4.9。
- 其他主要血清蛋白如α₁-球蛋白、α₂-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白的等电点大多在pH 4.8~7.0之间,多数低于pH 8.6。
3. 电泳条件分析:
- 本题中使用的缓冲液pH为8.6,明显高于所有血清蛋白质的等电点。
- 因此,在pH 8.6条件下,所有血清蛋白质的净电荷均为负值,即均带负电荷。
4. 电泳迁移方向:
- 由于所有蛋白质都带负电荷,在电场中将向阳极移动。
- 迁移速率不同主要由于分子大小、电荷量和分子构型的差异,其中白蛋白因分子小、负电荷密度高,迁移最快。
选项分析:
A:白蛋白带正电荷,其他蛋白带负电荷
错误。在pH 8.6时,白蛋白pI约4.8,远低于当前pH,故带负电荷,不可能带正电荷。
B:白蛋白带负电荷,其他蛋白带正电荷
错误。其他血清蛋白的pI也均低于8.6,因此同样带负电荷。
C:白蛋白和其他蛋白均带负电荷
正确。在pH 8.6碱性环境中,所有血清蛋白的净电荷均为负,符合两性电解质的电离规律。
D:白蛋白和其他蛋白均带正电荷
错误。只有在pH低于其pI时才带正电荷,而pH 8.6远高于所有血清蛋白的pI。
结论:
在pH 8.6缓冲液中进行血清蛋白电泳时,所有蛋白质均带负电荷,因此正确答案为C。
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