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简答题
2.简述单克隆抗体技术的基本原理。
答案解析
正确答案：答:单克隆抗体技术的基本原理为:小鼠骨髓瘤细胞在体内外适当条件下可无限增殖,但不能分泌抗体;抗原免疫后的小鼠脾细胞(B细胞)能产生特异性抗体,但在体外不能无限增殖。将上述骨髓瘤细胞与免疫脾细胞在体外通过一定方法融合后,在HAT选择性培养基,含次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)中培养,未融合的免疫脾细胞(B细胞)因不能在体外存活而死亡,未融合的骨髓瘤细胞因其DNA合成主要途径被氨基蝶呤阻断,同时又因缺乏次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用次黄嘌呤完成DNA的合成过程而死亡。融合成功的杂交瘤细胞可从免疫脾细胞中获得HGPRT,具有两个亲代细胞的特性,因此能在HAT培养基中存活和增殖。融合的杂交瘤细胞经筛选和克隆化,可获得能够产生某种特异性抗体的杂交瘤细胞,并可制备大量单克隆抗体。
