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简答题
36.利福平是一种重要的治疗结核病的抗菌素。有些结核杆菌菌株有抗利福平抗性。这些菌株通过在rpoB基因(它编码RNA聚合酶B亚基因)的突变获得抗性。利福平不能结合于突变的RNA聚合酶,因而不能阻断转录的起始,DNA序列分析表明,抗性突变发生在rpoB基因的69bp处,已知这个碱基的改变导致B亚基的氨基酸取代:一个组氨酸被天冬氨酸所取代。(a)根据有关蛋白质化学的知识提出一种能检出抗性菌株中这种突变蛋白的技术。(b)根据你的核酸化学知识,提出一种证实rpoB基因突变型的技术
答案解析
正确答案：答：(a)在突变株细胞裂解后,部分纯化酶蛋白并对蛋白进行等电聚焦分析,并使用突变8亚基的抗体用ELISA方法检出突变蛋白。(b)可以对突变基因直接进行Sanger双脱末端终止法DNA序列测定则可以确定突变株。
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