50. (名词解释, 1分)checkpoint:
细胞周期检验点。细胞周期检验点是指细 胞中对其之前阶段任务完成情况进行检测的某个特定位点,若完成则可 进入下一个细胞周期阶段,否则细胞将停留在该位点所处的阶段。这是 对细胞周期进行监控的重要机制。细胞周期检验点有G1期检验点、S期 检验点、G2期检验点、纺锤体装配检验点等。

67. (论述题, 10分)目前学术界对于主动运输与被动运输有这样一种说法,即被动运输是"减少细胞与周围环境的差别",而主动运输则是"努力创造差别,维持生命的活力",请结合所学谈谈你对于这个说法的理解。

5)cyclin的发现
在20世纪80年代初,以Tim Hunt为代表的一些科学家研究海洋无脊椎动物海胆等胚胎发育早期卵裂蛋白质的合成中,发现了细胞周期调控的另一个重要调控因子——周期蛋白(cyclin)。
进一步的研究表明,周期蛋白的合成与细胞进入M期及MPF活性密切相关,在G2期至M期的转换中起着重要的调控作用,这些实验结果显示,周期蛋白可能参与MPF的功能调节。
当MPF被提纯后,James Maller实验室和Tim Hunt实验室很快证明:MPF的另一种主要成分为周期蛋白B。至此,MPF的生化成分便被确定下来,它含有两个亚单位即Cdc2蛋白和周期蛋白,当二者结合后,表现出蛋白激酶活性,其中Cdc2为催化亚单位,周期蛋白为调节亚单位。(2分)

36. (简答题, 5分)癌细胞的基本特征
(1)细胞生长与分裂失去控制:癌细胞失去控制,成为“不死”的永生细胞,核质比例增大,分裂速度加快,破坏正常组织的结构与功能。
(2)具有浸润性和扩散性:恶性肿瘤细胞(癌细胞) 的细胞间黏着性下降, 具有浸润性和扩散性,易于浸润周围健康组织, 或通过血液循环和淋巴途径转移并在其他部位黏着和增殖,具有转移灶, 这是癌细胞的基本特征。
(3)细胞间相互作用改变:癌细胞冲破细胞识别作用的束缚,在转移过程中,除了会产生水解酶类(如用于水解基底膜成分的酶类),而且要异常表达某些膜蛋白,以便与其他细胞黏着和继续增殖。 并借此逃避免疫系统的监视, 防止天然杀伤细胞等的识别和攻击。
(4)表达谱改变或蛋白质活性改变:癌细胞的蛋白质表达谱系中,往往出现一些在胚胎细胞中所表达的蛋白质, 如在肝癌细胞中表达胚肝细胞中的多种蛋白质。多数癌细胞中具有较高的端粒酶活性。此外癌细胞还异常表达与其恶性增殖、 扩散等过程相关的蛋白质组分,如纤连蛋白表达减少, 如蛋白激酶Src、 转录因子Myc等过量表达。
(5)体外培养的恶性转化细胞的特征: 转化细胞同癌细胞一样具有无限增殖的潜能, 在体外培养时贴壁性下降, 可不依附在培养器皿壁上生长, 有些还可进行悬浮式培养, 癌细胞失去运动和分裂的接触抑制, 在软琼脂培养基中可形成细胞克隆, 这也是细胞恶性程度的标志之一。
(6)抵御死亡: 癌细胞凋亡调控通路的抑制, 获取了抗细胞凋亡的能力。

39. (简答题, 4分)Ras蛋白在信号转导中的作用。ras基 因突变会导致蛋白GTP酶活性丧失,并且会导致正常细胞发生癌变。请解释这一现象。
(1)Ras蛋白在信号转导中的作用: Ras蛋白是一种小的GTP结合蛋白,具有GTP酶活性,位于胞质侧,结 合GTP时为活化态,结合GDP时失活。Ras蛋白具有分子开关作用,激 活磷酸化级联反应。GAP增强Ras蛋白的GTP酶活性。 (2)突变Ras致癌的可能机制: 发生突变的Ras蛋白能够与GTP结合,但不能将其水解成GDP,从而使 自身锁定于活化状态,导致变性、细胞转化和肿瘤发生。

1)简单扩散特点是: ①沿浓度梯度(电化学梯度)方向扩散(由高到低) ②不需细胞提供能量 ③没有膜蛋白协助

47. (名词解释, 1分)nuclear pore complex:
核孔复合体是指在核被膜上由多种核孔蛋白构成的联系核质和细胞质的复杂隧道结构, 主要包括胞质环、 核质环、 辐和栓4种结构组分。从功能上讲, 核孔复合体可看成是一种特殊的跨膜运输蛋白复合体, 并且是一个双功能、 双向性的亲水性核质交换通道。 双功能性表现在被动扩散和主动运输两种运输方式, 双向性表现在既介导蛋白质入核转运,又介导RNA、 RNP出核转运。

1)染色体的早期凝集实验:20世纪70年代初,Johnson和Rao将Hela细胞的M期细胞与间期细胞进行融合,可引起间期细胞核染色质凝集,也即染色体早期凝集。说明M期细胞具有促进间期细胞进行分裂的因子,即成熟促进因子(MPF)。 (2分)

66. (论述题, 10分)什么是细胞内膜系统,它包括哪些结构?以溶酶体酶合成分选的M6P合成途径为例说明它们在功能上的相关性。

3)MPF的提纯工作:1988年Lohka等将MPF进行了高度纯化,证实,MPF是p34cdc2和周期蛋白B的复合物,其中p34cdc2是催化亚基,具有丝/苏氨酸激酶活性;周期蛋白B是调节亚基,具有激活p34cdc2活性等功能。当周期蛋白B和p34cdc2结合并经进一步活化形成活化的MPF后,细胞才能从G2期进入M期。由此证明,MPF是一种蛋白激酶。 (2分)