单选题
72. 实验室开展ELISA检测时,如果底物用四甲基联苯胺(TMB)时,阳性对照和阳性标本呈现色,酶标仪用( )nm波长检测( )
A
蓝色,492
B
橙红色,450
C
棕色,500
D
蓝色,450
答案解析
正确答案:D
解析:
### ELISA检测的基本原理
ELISA是一种常用的生物化学分析方法,主要用于检测和定量样品中的抗原或抗体。其基本原理是利用抗原和抗体之间的特异性结合,通过酶标记的抗体与底物反应生成可测量的信号(通常是颜色变化)。
### 四甲基联苯胺(TMB)
在ELISA中,四甲基联苯胺(TMB)是一种常用的底物。当酶(如辣根过氧化物酶,HRP)与TMB反应时,会产生一种蓝色的化合物。这个蓝色的化合物在一定条件下会氧化,最终形成棕色的沉淀。
### 波长的选择
在进行ELISA检测时,使用酶标仪测量反应液的吸光度。不同的底物和反应产物在不同的波长下会有不同的吸光度特征。对于TMB,最佳的检测波长通常是在450 nm附近,因为在这个波长下,蓝色的反应产物吸光度最强。
### 选项分析
现在我们来分析题目中的选项:
- **A: 蓝色, 492 nm** - 492 nm不是TMB反应的最佳波长。
- **B: 橙红色, 450 nm** - 450 nm是TMB反应的最佳波长,但描述颜色不准确。
- **C: 棕色, 500 nm** - 棕色是TMB反应后氧化产物的颜色,但500 nm不是最佳波长。
- **D: 蓝色, 450 nm** - 450 nm是TMB反应的最佳波长,且颜色描述为蓝色,符合反应初期的颜色。
### 正确答案
因此,正确答案是 **D: 蓝色, 450 nm**。在这个波长下,酶标仪能够最有效地检测到TMB底物的反应产物。
### 生动的例子
想象一下,你在厨房里做蛋糕。你需要用烤箱来烤蛋糕,而温度和时间的选择会直接影响蛋糕的成品。ELISA就像这个烤蛋糕的过程,TMB底物是蛋糕的原料,而450 nm的波长就像是烤箱的最佳温度。只有在正确的温度下,蛋糕才能烤得松软可口;同样,只有在正确的波长下,ELISA的结果才能准确可靠。
ELISA是一种常用的生物化学分析方法,主要用于检测和定量样品中的抗原或抗体。其基本原理是利用抗原和抗体之间的特异性结合,通过酶标记的抗体与底物反应生成可测量的信号(通常是颜色变化)。
### 四甲基联苯胺(TMB)
在ELISA中,四甲基联苯胺(TMB)是一种常用的底物。当酶(如辣根过氧化物酶,HRP)与TMB反应时,会产生一种蓝色的化合物。这个蓝色的化合物在一定条件下会氧化,最终形成棕色的沉淀。
### 波长的选择
在进行ELISA检测时,使用酶标仪测量反应液的吸光度。不同的底物和反应产物在不同的波长下会有不同的吸光度特征。对于TMB,最佳的检测波长通常是在450 nm附近,因为在这个波长下,蓝色的反应产物吸光度最强。
### 选项分析
现在我们来分析题目中的选项:
- **A: 蓝色, 492 nm** - 492 nm不是TMB反应的最佳波长。
- **B: 橙红色, 450 nm** - 450 nm是TMB反应的最佳波长,但描述颜色不准确。
- **C: 棕色, 500 nm** - 棕色是TMB反应后氧化产物的颜色,但500 nm不是最佳波长。
- **D: 蓝色, 450 nm** - 450 nm是TMB反应的最佳波长,且颜色描述为蓝色,符合反应初期的颜色。
### 正确答案
因此,正确答案是 **D: 蓝色, 450 nm**。在这个波长下,酶标仪能够最有效地检测到TMB底物的反应产物。
### 生动的例子
想象一下,你在厨房里做蛋糕。你需要用烤箱来烤蛋糕,而温度和时间的选择会直接影响蛋糕的成品。ELISA就像这个烤蛋糕的过程,TMB底物是蛋糕的原料,而450 nm的波长就像是烤箱的最佳温度。只有在正确的温度下,蛋糕才能烤得松软可口;同样,只有在正确的波长下,ELISA的结果才能准确可靠。
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